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atto發(fā)光檢測裝置的應(yīng)用
化學(xué)發(fā)光和生物發(fā)光廣泛應(yīng)用于各個領(lǐng)域，從 ATP 測定和活性氧/抗氧化能力測量到使用熒光素酶作為報告基因的基因表達(dá)分析。ATTO 的發(fā)光檢測設(shè)備與從微孔板到試管和培養(yǎng)皿的各種樣品格式兼容，并用于生命科學(xué)的前沿。
| 型號/產(chǎn)品名稱 | AB-2550 計時迪奧 | AB-2350 費(fèi)利奧斯 | AB-2270 八角發(fā)光傳感器 |
|---|---|---|---|
 |  |  | |
| 樣品數(shù)量 | 8個樣品 | 96/384 個樣本 | 1 個樣品 |
| 探測器 | 光電倍增管（PMT） | 光電倍增管（PMT） | 光電倍增管（PMT） |
| 檢測方法 | 光子計數(shù) | 光子計數(shù) | 光子計數(shù) |
| 容器 | φ35mm培養(yǎng)皿 | 微孔板96孔/384孔 | φ12mm x 55mm管 1.5mL離心管 |
| 溫控功能 | 室溫-5℃～45℃ | 室溫+5℃～40℃ | 室溫+5℃~40℃（可選） |
| CO2氣體介紹 | ○（5%調(diào)整） | × | × |
| 保濕 | ○ | × | × |
| 試劑分配 | × | ○ | ○ |
| 分色功能 | ○ | ○ | ○ |
| 設(shè)備控制 | 電腦控制 | 電腦控制 | 主體面板 |
報告基因檢測是基因表達(dá)分析方法之一，當(dāng)使用熒光素酶作為報告基因時，稱為熒光素酶檢測。通過使用熒光素酶進(jìn)行基因表達(dá)分析，可以根據(jù)發(fā)光量來定量檢測目標(biāo)基因的表達(dá)水平。
一種基本的熒光素酶測定方法。許多都以套件形式提供。由于細(xì)胞活性和數(shù)量等問題，比較樣本之間的數(shù)據(jù)可能很困難。因此，存在允許提供內(nèi)標(biāo)的雙熒光素酶測定的趨勢。
這是一種使用兩種類型的熒光素酶基因的熒光素酶測定。通過將目標(biāo)基因的啟動子與第一熒光素酶基因連接，并通過將穩(wěn)定表達(dá)的基因的啟動子與第二熒光素酶基因連接來進(jìn)行測定，使用第二熒光素酶作為內(nèi)標(biāo)和樣品，這增加了分析的可靠性。之間的數(shù)據(jù)比較 由于使用了兩種類型的熒光素酶，因此必須添加兩次具有不同最佳條件的發(fā)光底物。
這是一種使用兩到三種類型的熒光素酶基因的熒光素酶測定。對于三種類型的熒光素酶，可以通過一次添加一種類型的發(fā)光底物來測量所有基因表達(dá)。因此，可以測量同一樣本中的內(nèi)標(biāo)和兩類基因的表達(dá)。另外，不存在因條件變化而導(dǎo)致發(fā)光量變化的問題。由于同時發(fā)出三種顏色，因此儀器需要分色測量機(jī)構(gòu)。各種熒光素酶測定的測壓儀兼容性表
這是一種在培養(yǎng)細(xì)胞的同時測量細(xì)胞而不破壞細(xì)胞的方法。通過使用添加了降解促進(jìn)信號（例如PEST序列）的熒光素酶基因，可以縮短細(xì)胞內(nèi)熒光素酶的壽命，從而提高其跟蹤啟動子活性變化的能力。
這是一種在培養(yǎng)細(xì)胞的同時測量細(xì)胞而不破壞細(xì)胞的方法。通過使用添加了降解促進(jìn)信號（例如PEST序列）的熒光素酶基因，可以縮短細(xì)胞內(nèi)熒光素酶的壽命，從而提高其跟蹤啟動子活性變化的能力。
各種熒光素酶測定的測壓儀兼容性表
| 測量方法 | AB-2270 | AB-2270-R | AB-2350 | AB-2550 | AB-3000B |
|---|---|---|---|---|---|
| 熒光素酶測定 | ○ | ○ | ○ | ○ | ○ |
| 雙熒光素酶測定 | ○ | ○ | ○ | × | × |
| 多色熒光素酶測定 | ○ | ○ | ○ | ○ | ○ |
| 活細(xì)胞測定 | × | × | △ | ○ | ○ |
應(yīng)用實(shí)例
中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞活性氧產(chǎn)生能力的評價
活性氧清除系統(tǒng)（超氧化物歧化酶、過氧化氫酶等）的測量
活性氧生成系統(tǒng)（NAD(P)H氧化酶、氧化酶等）的測定
用于發(fā)光測量的測壓儀兼容性表
| 測量方法 | AB-2270 | AB-2270-R | AB-2350 | AB-2550 |
|---|---|---|---|---|
| 活性氧測量 | ○ | △ | ○ | ○ |
*：對于 AB-2270/AB-2270-R，我們建議添加可選的溫度控制功能。
■抗氧化能力測量的基本概念 (a)：[用產(chǎn)生一定量超氧化物的系統(tǒng)（例如次氧化酶系統(tǒng)）測量發(fā)光強(qiáng)度] (b)：[將抗氧化劑樣品添加到 (a) [測量添加后的發(fā)光強(qiáng)度] 根據(jù)這兩個值計算抑制率。
抑制率(%)=[1-(b)/(a)]×100
用于發(fā)光測量的測壓儀兼容性表
| 測量方法 | AB-2270 | AB-2270-R | AB-2350 | AB-2550 |
|---|---|---|---|---|
| 抗氧化測量 | ○ | △ | ○ | △ |
